發送復蘇大鼠主動脈內皮細胞方式:
(1)存細胞,收到后應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時。具體操作見細胞培養步驟。
(2)收到細胞后請拍照,3天內如果發現污染,請及時拍照與我們聯系。
2、大鼠主動脈內皮細胞接收后的處理:
(1)收到細胞后,請檢查漏液,如果漏液,請拍照片發給我們。
(2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
(3)棄去T25瓶中的培養基,添加6ml新的完全培養基。
(4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代。
(5)接到細胞次日,請檢查細胞污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系。
二、細胞培養步驟
1、培養基及培養凍存條件準備:
(1)準備基礎培養基,北美胎牛血清5%,添加劑1%;雙抗1%。
(2)培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
2、細胞處理:
(1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。
(2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
3、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
(1)選用原代細胞生長狀態好(90-95%),生長數量大于5